白首乌多糖降血脂作用研究
【摘要】 目的研究白首乌多糖抗高血脂的药理作用。方法采用水提醇沉法提取，用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白精制多糖。将80只昆明种小鼠随机分成5组，即正常对照组、高脂对照组(模型组)、白首乌多糖小、中、大剂量组。测定白首乌多糖对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果白首乌多糖高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P<0.01)，并可显著升高HDL-C(P<0.01)。结论白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力；白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。
【关键词】 白首乌； 多糖； 高血脂症； 降血脂
耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle exWight系萝藦科(Asclepiadaceae)马利筋亚科(Ascle-pioideae)鹅绒藤属(Cynanchum linn)植物，又名飞来鹤(《植物名实图考》)，老牛冻(湖南，四川)［1］；在我国资源丰富，山东、江苏有人工栽培，药用其块根；具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效［1，2］。白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的意义［3，4］。本实验研究白首乌多糖的降血脂作用。
1 器材
1.1 药材与试剂本实验所用白首乌购自江苏滨海，经湖南省药检所方石林教授鉴定为萝摩科植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight，实验用酒精（AR），总胆固醇(TC) 试剂盒(南京建成生物工程研究所)，甘油三酯(TG)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)， 高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。氯仿、丙酮、乙醚、正丁醇均为分析纯。
1.2 动物
昆明种雄性小鼠80只,体质量(20±2)g，长沙市开福区实验动物科技服务部提供,动物合格证号：湘000468。
1.3 仪器与设备
电热恒温干燥箱，202－3AB型，天津市泰斯特仪器有限公司产品；
电热恒温水浴锅，DK－98—1A，天津市泰斯特仪器有限公司产品；
真空旋转蒸发器，RE 52－99，上海亚荣生化仪器厂产品；
抽滤机，SHB－B95型，郑州长城科工贸有限公司产品。总胆固醇(TC) 试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；
甘油三酯(TG)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；
试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；
高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；
乙醇95%，分析纯AR，长沙安泰精细化工实业有限公司产品；
离心沉淀机，LXT－II，上海医用分析仪器厂产品；
氯仿，GB 682－89，上海山浦化工有限公司产品；
正丁醇，HG3－1012－76，上海山浦化工有限公司产品；
分析天平，TG328B， 湘仪天平仪器厂产品。
2 方法
2.1 白首乌多糖的提取和纯化
采用水提醇沉法提取白首乌多糖。取白首乌粉末于圆底烧瓶中，加入3倍量85%酒精，回流脱脂。将浸提脱脂后的样品，在90℃恒温水浴中热水浸提2 h，过滤后，滤渣在相同条件下重复浸提1次。减压过滤，去除滤渣，合并滤液。将滤液减压浓缩至最小体积。在浓缩后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，经抽滤，真空干燥后得粗多糖。 粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止。脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，经抽滤、干燥后得到精制多糖。
2.2 动物分组及处理实验分为5组，即：正常对照组、高脂对照组、低剂量白首乌多糖组、中剂量白首乌多糖组、高剂量白首乌多糖组。除基础饲料组(正常对照组)外，其它各组均采用高脂饲料(猪油10％，胆固醇5％，基础饲料75％)喂饲。以每天灌胃量为大鼠体重的2％将白首乌多糖配制成相应浓度的溶液，各剂量组给予白首乌的量是：低剂量组50 mg/kg体质量；中剂量组100 mg/kg体质量；高剂量组200 mg/kg体质量。正常对照组和高脂对照组给予相应体积的蒸馏水，实验期为10 d。 2.3 血样采集及预处理 喂养结束后，大鼠禁食12 h，摘眼球取血，离心(3 000 r/min，15 min)分离血清，待测。 2.4 测定指标及方法 2.4.1 血清总胆固醇(TC)采用酶比色法(CHOD-PAP法)测定。 2.4.2 血清甘油三酯(TG)采用酶比色法(GPO-PAP法)测定。 2.4.3 血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)采用聚乙烯硫酸沉淀法测定。 2.4.4 血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用磷酸钨-镁沉淀法测定。采用UV1800紫外分光光度仪测定数据。 2.5 实验数据处理实验数据均在LENOVO-compatible PC 机Windows XP系统下采用Excel 2003进行计算和统计学处理，并用T-test来分析组间差异的显著性。结果以±s表示。文字处理软件用Microsoft Word 2003。 3 结果 4 讨论 【参考文献】
见表1。由表1可以看出，高脂对照组的TC、TG和LDL-C显著高于正常对照组(P<0.05)，而HDL-C无变化 (P>0.05)，表示本实验高血脂模型造模成功,说明高脂饲料能够造成小鼠实验性高脂血症；给予低剂量的白首乌多糖对高脂血症大鼠的TG、LDL-C和HDL-C无显著影响(P>0.05)，但可以使TC极显著地降低(P<0.01)；中剂量白首乌多糖组中，TC、TG和LDL-C均显著低于高脂对照组(P<0.05)，HDL-C显著高于高脂对照组(P
由以上结果可知，白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力，因此具有降血脂生理活性，可能对高脂血症的发生有一定的预防作用。
采用高脂饲料配方喂食大鼠来诱导其高脂血症，实验结果表明，白首乌多糖能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C，升高HDL-C，且高剂量组各项指标之间均无明显差异，说明高剂量的白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。白首乌多糖能够显著提高高脂血症大鼠的HDL-C／TC水平，说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用。
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［3］Friedwald WT．Estimation of Conantration of LowDensityLipo protein Cholesterol in Plasma without Use of theReparative Ultracentrifuge［J］.Chin Chen，1992，18(3)：499．
［4］饶颖竹，陈蓉，莫锦坚，等．仙人掌对小鼠实验性高血脂症的降脂作用［J］.中国康复医学杂志，2004，19(7)：523．
