70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体检测结果分析
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时间：2011年3月11日 13:21
【摘要】 目的 比较阴道分泌物和血清样品HIV抗体检测结果,探讨阴道分泌物样品检测HIV抗体的可行性。方法 应用血清学方法,对70例阴道分泌物与血清配对样品进行HIV抗体检测。比较阴道分泌物与血清样品的阳性符合率、阴性符合率及30例阴道分泌物与血清 HIV抗体阳性配对样品的含量、WB抗原带型。结果 70例阴道分泌物与血清配对样品的阳性符合率、阴性符合率均为100%。30例阴道分泌物样品的HIV抗体阳性含量低于血清样品的HIV抗体阳性含量（P＜0.01）。WB实验显示,与阳性血清配对的阴道分泌物样品至少出现gp160和p 24两条带型。结论 阴道分泌物可以作为HIV抗体检测的实验样品。对妇科女性生殖道感染患者的HIV筛查,有其重要的应用价值。快速发表论文
【关键词】 阴道分泌物与血清配对样品 HIV抗体 HIV筛查
【Abstract】 Objective To evaluate the feasibility of detecting HIV antibody in vaginal secretion by comparing the results of vaginal secretion and serum samples of HIV antibody.Methods HIV antibody in 70 vaginal secretion and serum matched samples was detected. The positive consistency and negative consistency in vaginal secretion and serum,OD values and WB antigen type of 30 positive HIV antibody samples were compared.Results The positive and negative relative coincident rate of 70 vaginal secretion and serum matched samples was 100%. In general analyzing, HIV antibody quantities of 70 vaginal secretion samples was lower than that of serum samples. Vaginal secretion samples matched positive serum samples appeared at least two pieces belt type by WB.Conclusion Vaginal secretion can be used for HIV antibody detection. It has some important practical values in some special population groups and under special conditions.
【Key words】 Vaginal secretion and serum matched samples；HIV antibody；Comparison
人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）感染者体内的血液、精液、脑脊液、阴道分泌物、尿液等都含有可检测到的HIV抗体。目前，HIV实验室初筛主要是检测抗体，最常用的样品是血清或血浆，唾液或尿液有时也可作为检测样品［1］。但阴道分泌物作为HIV抗体检测样品国内尚未见有报道。本文应用血清学方法,对70例阴道分泌物与血清配对样品进行了HIV抗体检测，并比较分析，旨在探讨阴道分泌物样品检测HIV抗体的可行性。结果报告如下。
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材料和方法
1.标本采集和处理
阴道分泌物与血清配对样品被检者均为经本人同意的妇科、性病科或HIV抗体阳性者70例，年龄19岁～55岁。首先用无菌棉拭子插入宫颈口旋转 3～4圈，并停留10 s，然后取出宫颈分泌物，再取阴道侧壁分泌物放入盛有1 ml无菌生理盐水试管内，将棉拭子上分泌物洗入无菌生理盐水试管后，取出棉拭子，将试管内分泌物无菌生理盐水混匀，离心10 min，取上清液放入另一支无菌试管中加盖，同时采集同一人的血清样品3 ml，两种标本一起置-20℃冰箱保存。所有样品在同一条件下检测。
2.主要试剂及结果判定标准
HIV?1/2第3代ELISA，为珠海丽珠试剂有限公司生产,批号200668；WB DiagnosticHIV Blot 2·3试剂，为新加坡Genelabs公司生产,批号AE6016。结果判定样品的OD 值≥1为HIV1/2抗体阳性, ＜1为HIV1/2抗体阴性。
3.统计学处理
计量资料以均数±标准差（-?±s）表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为有显著性差异。
结 果
1.阴道分泌物与血清配对样品检测符合率比较 70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率皆为100%，见表1。表1 70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率（略）快速发表论文
2.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品含量比较
30例阴道分泌物样品HIV的平均含量为7.52±2.27，血清样品HIV的平均含量为9.97±2.32，两者比较有显著性差异(t=4.132，P＜0.01)。提示阴道分泌物样品的HIV抗体含量低于血清样品的HIV抗体含量。
3.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果
从WB实验反应强度来看,阴道分泌物阳性样品至少出现包膜抗原gp120和核心抗原p24 两条阳性带型，5例其它阳性带型与血清样品一样，OD值高的阴道分泌物样品与血清样品一样均出现阳性带型, 尤其是gp120和p24两条带型均为强阳性，OD值低的阴道分泌物样品，gp120和p24两条带型出现较弱（见表2、图1）。按艾滋病诊断标准［1］，30例阴道分泌物样品与血清配对样品均可确认为HIV?1型病毒感染。表2 30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果（略）
讨论
从本次WB实验结果分析，70例阴道分泌物与血清配对样品阳性与阴性符合率及30例阴道分泌物与血清配对阳性样品符合率为100%，Belec L等［2］报道采用IgG ELISA试剂盒检测HIV抗体，敏感性为97.7%,特异性为97.6%,说明阴道分泌物HIV抗体阳性检出率与血清阳性检出率结果一致性高，可作为 HIV筛查的实验样品。有研究证实［3，4］，通过性传播感染HIV患者不断增多，女性生殖道感染（如细菌性、淋球菌感染）者容易感染HIV，已感染 HIV的性病患者也易将HIV传予他人，而且HIV在女性生殖道可单独复制，接触阴道分泌物感染HIV的危险性很高，因此宫颈、阴道炎患者是国家防治 HIV的重点检测的高危人群之一，女性生殖道感染者采集阴道分泌物做常规检查的同时做HIV抗体检测，对患者为无创伤采样、简便易接受，对这些特定的高危人群和某些特殊情况下,进行艾滋病筛查有重要应用价值。
本次实验对30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品的OD值进行比较，结果为阴道分泌物的HIV抗体含量低于血清HIV抗体含量。HIV 含量高的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120的抗原条带为强阳性，其它抗原带型弱于血清样品， HIV含量低的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120抗原条阳性带型较弱于血清样品。所有样品中都至少出现gp120和p24两条带型，25 例阴道分泌物样品中WB显示的其它抗原阳性条带与血清样品不同,其中酶抗原p31出现最少。从实验结果进行总体分析30例阴道分泌物HIV抗体阳性者，均符合HIV?1型病毒感染诊断标准。Belec L等［5］从一名血清HIV抗体阴性被强暴妇女的阴道分泌物及阴道分泌物混合液中检测出HIV抗体阳性,为评价艾滋病感染的危险性和采取紧急预防措施提供了实验依据。可见，采集阴道分泌物样品检测HIV抗体，可为HIV筛查及个案诊断提供比较可靠的辅助诊断依据。
快速发表论文
【参考文献】
［1］中国疾病预防控制中心.全国艾滋病检测技术规范(2004年版)［S］,2004，1-7.
［2］Belec L，Gresenguet G，Dragon MA,et al.Detection of antibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions by immunoglobulin G antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay: application to detection of seminal antibodies after sexual intercourse［J］.J Clin Microbiol,1994,32(5):1249.
［3］蒋 娟.细菌性阴道病与HIV感染［J］.国外医学·皮肤性病学分册，2001，37（4）：216-218.
［4］Iuersen A.k.N./Attermann J./Gerstof J.［A.K.N.lversen,Human lmmunology Unit,Weatherallinst.of Molec.Medicine,John Radcliffe Hospital,ox39AD,oxford,Unitedkingdom］-EUR.J.OBSTET.GY- NECOL,REPROD.BLOL.2004,117/2(227-235).
［5］BelecL,MattaM,Payan C,et al.Detection ofseminalantibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions after sexual intercourse: possible means of preventing the risk of human immunodeficiency virus transmission in a rape victim［J］.JMed Viro,l，1995, 45(1):113-116.
【关键词】 阴道分泌物与血清配对样品 HIV抗体 HIV筛查
【Abstract】 Objective To evaluate the feasibility of detecting HIV antibody in vaginal secretion by comparing the results of vaginal secretion and serum samples of HIV antibody.Methods HIV antibody in 70 vaginal secretion and serum matched samples was detected. The positive consistency and negative consistency in vaginal secretion and serum,OD values and WB antigen type of 30 positive HIV antibody samples were compared.Results The positive and negative relative coincident rate of 70 vaginal secretion and serum matched samples was 100%. In general analyzing, HIV antibody quantities of 70 vaginal secretion samples was lower than that of serum samples. Vaginal secretion samples matched positive serum samples appeared at least two pieces belt type by WB.Conclusion Vaginal secretion can be used for HIV antibody detection. It has some important practical values in some special population groups and under special conditions.
【Key words】 Vaginal secretion and serum matched samples；HIV antibody；Comparison
人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）感染者体内的血液、精液、脑脊液、阴道分泌物、尿液等都含有可检测到的HIV抗体。目前，HIV实验室初筛主要是检测抗体，最常用的样品是血清或血浆，唾液或尿液有时也可作为检测样品［1］。但阴道分泌物作为HIV抗体检测样品国内尚未见有报道。本文应用血清学方法,对70例阴道分泌物与血清配对样品进行了HIV抗体检测，并比较分析，旨在探讨阴道分泌物样品检测HIV抗体的可行性。结果报告如下。
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材料和方法
1.标本采集和处理
阴道分泌物与血清配对样品被检者均为经本人同意的妇科、性病科或HIV抗体阳性者70例，年龄19岁～55岁。首先用无菌棉拭子插入宫颈口旋转 3～4圈，并停留10 s，然后取出宫颈分泌物，再取阴道侧壁分泌物放入盛有1 ml无菌生理盐水试管内，将棉拭子上分泌物洗入无菌生理盐水试管后，取出棉拭子，将试管内分泌物无菌生理盐水混匀，离心10 min，取上清液放入另一支无菌试管中加盖，同时采集同一人的血清样品3 ml，两种标本一起置-20℃冰箱保存。所有样品在同一条件下检测。
2.主要试剂及结果判定标准
HIV?1/2第3代ELISA，为珠海丽珠试剂有限公司生产,批号200668；WB DiagnosticHIV Blot 2·3试剂，为新加坡Genelabs公司生产,批号AE6016。结果判定样品的OD 值≥1为HIV1/2抗体阳性, ＜1为HIV1/2抗体阴性。
3.统计学处理
计量资料以均数±标准差（-?±s）表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为有显著性差异。
结 果
1.阴道分泌物与血清配对样品检测符合率比较 70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率皆为100%，见表1。表1 70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率（略）快速发表论文
2.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品含量比较
30例阴道分泌物样品HIV的平均含量为7.52±2.27，血清样品HIV的平均含量为9.97±2.32，两者比较有显著性差异(t=4.132，P＜0.01)。提示阴道分泌物样品的HIV抗体含量低于血清样品的HIV抗体含量。
3.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果
从WB实验反应强度来看,阴道分泌物阳性样品至少出现包膜抗原gp120和核心抗原p24 两条阳性带型，5例其它阳性带型与血清样品一样，OD值高的阴道分泌物样品与血清样品一样均出现阳性带型, 尤其是gp120和p24两条带型均为强阳性，OD值低的阴道分泌物样品，gp120和p24两条带型出现较弱（见表2、图1）。按艾滋病诊断标准［1］，30例阴道分泌物样品与血清配对样品均可确认为HIV?1型病毒感染。表2 30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果（略）
讨论
从本次WB实验结果分析，70例阴道分泌物与血清配对样品阳性与阴性符合率及30例阴道分泌物与血清配对阳性样品符合率为100%，Belec L等［2］报道采用IgG ELISA试剂盒检测HIV抗体，敏感性为97.7%,特异性为97.6%,说明阴道分泌物HIV抗体阳性检出率与血清阳性检出率结果一致性高，可作为 HIV筛查的实验样品。有研究证实［3，4］，通过性传播感染HIV患者不断增多，女性生殖道感染（如细菌性、淋球菌感染）者容易感染HIV，已感染 HIV的性病患者也易将HIV传予他人，而且HIV在女性生殖道可单独复制，接触阴道分泌物感染HIV的危险性很高，因此宫颈、阴道炎患者是国家防治 HIV的重点检测的高危人群之一，女性生殖道感染者采集阴道分泌物做常规检查的同时做HIV抗体检测，对患者为无创伤采样、简便易接受，对这些特定的高危人群和某些特殊情况下,进行艾滋病筛查有重要应用价值。
本次实验对30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品的OD值进行比较，结果为阴道分泌物的HIV抗体含量低于血清HIV抗体含量。HIV 含量高的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120的抗原条带为强阳性，其它抗原带型弱于血清样品， HIV含量低的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120抗原条阳性带型较弱于血清样品。所有样品中都至少出现gp120和p24两条带型，25 例阴道分泌物样品中WB显示的其它抗原阳性条带与血清样品不同,其中酶抗原p31出现最少。从实验结果进行总体分析30例阴道分泌物HIV抗体阳性者，均符合HIV?1型病毒感染诊断标准。Belec L等［5］从一名血清HIV抗体阴性被强暴妇女的阴道分泌物及阴道分泌物混合液中检测出HIV抗体阳性,为评价艾滋病感染的危险性和采取紧急预防措施提供了实验依据。可见，采集阴道分泌物样品检测HIV抗体，可为HIV筛查及个案诊断提供比较可靠的辅助诊断依据。
快速发表论文
【参考文献】
［1］中国疾病预防控制中心.全国艾滋病检测技术规范(2004年版)［S］,2004，1-7.
［2］Belec L，Gresenguet G，Dragon MA,et al.Detection of antibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions by immunoglobulin G antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay: application to detection of seminal antibodies after sexual intercourse［J］.J Clin Microbiol,1994,32(5):1249.
［3］蒋 娟.细菌性阴道病与HIV感染［J］.国外医学·皮肤性病学分册，2001，37（4）：216-218.
［4］Iuersen A.k.N./Attermann J./Gerstof J.［A.K.N.lversen,Human lmmunology Unit,Weatherallinst.of Molec.Medicine,John Radcliffe Hospital,ox39AD,oxford,Unitedkingdom］-EUR.J.OBSTET.GY- NECOL,REPROD.BLOL.2004,117/2(227-235).
［5］BelecL,MattaM,Payan C,et al.Detection ofseminalantibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions after sexual intercourse: possible means of preventing the risk of human immunodeficiency virus transmission in a rape victim［J］.JMed Viro,l，1995, 45(1):113-116.
