不同炮制方法对延胡索中有效成分含量的影响
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发布者：曹柳,窦志英,王萍,田永亮
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时间：2011年5月05日 14:14
【摘要】 目的 比较不同炮制方法对延胡索中3种有效成分含量的影响。方法 将鲜延胡索、水煮延胡索和市售的延胡索药材分别经醋煮、醋炙和酒炙后,分别采用水超声法和甲醇热回流法进行提取,采用反相高效液相色谱法测定3种有效成分的含量。色谱柱为Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 5.3) 为28∶72,流速：1 mL/min,柱温：35 ℃,检测波长：280 nm。结果 延胡索经炮制后水提液中生物碱含量均有所提高,醇提液中生物碱含量也有上升的趋势；延胡索鲜品直接经醋炙、醋煮、酒炙处理后,去氢紫堇碱含量较高,延胡索在产地水煮后延胡索乙素含量较高。结论 本研究建立了同时检测延胡索中3种有效成分的检测方法,该方法简便、可靠、重复性好。根据临床需要,延胡索炮制工艺可采用鲜品水煮后再炮制或产地加工和炮制一体化的两种操作方式。会计论文发表
【关键词】 延胡索；原阿片碱；去氢紫堇碱；延胡索乙素；高效液相色谱法；炮制
Abstract：Objective To explore the effect of different processes on the contents of active ingredients in Rhizoma Corydalis. Methods Processes of vinegar-boiling, vinegar-frying and alcohol-frying were used to fresh corydalis, boiled corydalis and purchased corydalis. Then the method of extraction by ultrasound with water and by reflux with methanol were used to extract the sample. The contents of Protopine, Tetrahydropalmatine and Dehydrocorydaline in corydalis was determined by RP-HPLC. Agilent TC-C18 (25 mm×4.6 mm, 5 μm) column was used at 35 ℃, with acetonitrile-0.1% phosphonic acid (pH 5.3 with triethylamine) (28∶72) as mobile phase. The flow rate was 1 mL/min and detection wavelength was set at 280 nm. Results In the sample extracted by water, the contents of active ingredients in processed products were higher than in corydalis. And in the sample extracted by methanol, it also has the tendency that the contents of active ingredients in processed products were higher than in corydalis. The content of Dehydrocorydaline in fresh corydalis which was processed by vinegar-boiling, vinegar-frying and alcohol- frying was high. The content of Tetrahydropalmatine in purchased corydalis which was processed by water-boiling at production place was high. Conclusion The method of determining active ingredients in Rhizoma Corydalis was established. It was convenient and the result was accurate. The process technology that fresh corydalis was boiled by water and then processed or fresh corydalis was processed in production place can be used.
Key words：Corydalis；Protopine；Dehydrocorydaline；Tetrahydropalmatine；HPLC；process
会计论文发表
延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎,具有活血、利气、止痛功效,临床用于治疗胸胁、脘腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻、跌扑肿痛等症[1],主产于浙江。延胡索中主要有效成分为生物碱,生物碱在药材中多数以结合态的生物碱盐存在,少数碱性极弱的以游离态形式存在。延胡索的药理作用表现为镇痛、催眠、降低冠脉阻力及增加血流量等,另外亦对心血管系统有较好的药理活性。延胡索多炮制后入药, 主要炮制方法为醋煮、醋炙和酒炙。本试验采用水超声提取法和甲醇加热回流提取法分别提取总生物碱盐和总生物碱,通过高效液相色谱法比较了不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素、原阿片碱和去氢紫堇碱含量的影响,为优化延胡索炮制工艺和阐明炮制机理奠定基础。
1 仪器与试药
烘箱DHG78-1(湖北省黄石市医疗器械厂)；日本岛津HPLC系统(SCL-10AVP HPLC Pump；SPD-ML0AVP二级管阵列检测器)；自动进样系统；超声波清洗器AS20500AT(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。甲醇、乙腈为色谱纯 (天津市协和昊鹏色谱科技有限公司)；其余试剂均为分析纯；水为超纯水。延胡索乙素(批号0726-200409,中国药品生物制品检定所)；去氢紫堇碱(批号043-27611,日本和光纯药工业株式会社)；原阿片碱(批号0853-200201,中国药品生物制品检定所)。
鲜延胡索药材产自浙江东阳；市售延胡索购于天津中新药业集团股份有限公司药材分公司,产自浙江。经本校中药鉴定教研室马琳教授鉴定为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的块茎。
2 方法与结果
2.1 样品的制备
醋煮延胡索：取延胡索适量,加入20%的醋,加适量水没过药面,浸润4 h,煮干[2]。
醋炙延胡索：取延胡索适量,加入20%的醋,加适量水没过药面,浸润4 h,文火炒干[3]。
会计论文发表
酒炙延胡索：取延胡索适量,加入10%的酒,加适量水没过药面,浸润4 h,文火炒干。
鲜延胡索：将新鲜的延胡索经过晾晒后(含水量约为20%),除去泥土,洗净,按照上述各炮制方法进行炮制。
水煮延胡索：将新鲜的延胡索经过晾晒后(含水量约为20%),加水煮至内无白心,取出,干燥。按照上述各炮制方法进行炮制。
市售延胡索：直接按照各炮制方法进行炮制。
2.2 延胡索乙素、去氢紫堇碱和原阿片碱的含量测定
2.2.1 色谱条件与系统性试验
色谱柱为Agilent TC-C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),美国安杰伦公司；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 5.3)＝28∶72,流速为1 mL/min,柱温为35 ℃,检测波长为280 nm。在此条件下,理论塔板数按延胡索乙素峰、去氢紫堇碱峰和原阿片碱峰计算均不低于3 000。空白溶剂色谱图中在与延胡索乙素、去氢紫堇碱、原阿片碱色谱峰相应位置上无色谱峰,说明此系统条件无干扰。色谱图见图1。
2.2.2 对照品溶液的制备
精称去氢紫堇碱对照品6.63 mg、延胡索乙素对照品2.15 mg、原阿片碱对照品1.776 mg,分别置10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度。再吸取去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱对照品溶液5、1.7、2 mL于同一10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,配制去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱浓度为0.331 5 mg/mL、0.036 55 mg/mL、0.035 52 mg/mL的混合对照品溶液。
会计论文发表
2.2.3 供试品溶液的制备
①水超声提取法：精称各样品粉末0.5 g,加水25 mL,称重,超声提取30 min后,再称重补足减失重量,过滤,共提取2次,合并滤液,定容到100 mL。过0.45 μm滤膜,取续滤液,即得。②甲醇回流提取法：参考文献[1], 精确称取各样品粉末0.5 g,精密加入浓氨试液-甲醇(1∶20)混合溶液50 mL,称定重量,冷浸1 h后加热回流1 h,放冷,再称定重量,用浓氨试液-甲醇(1∶20)混合溶液补足减失重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25 mL,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5 mL容量瓶中并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液。
2.2.4 线性关系的考察
精密吸取混合对照品储备液,以甲醇配置成不同浓度的混标溶液,分别吸取10 μL注入高效液相色谱仪,测定峰面积。以峰面积为横坐标,进样量为纵坐标,绘制标准曲线。测定水提液去氢紫堇碱的回归方程为：Y＝3×10-8X＋0.000 5,r＝0.999 9,线性范围为0.025 875～0.345 μg。延胡索乙素的回归方程为：Y＝1×10-7X＋0.000 2,r＝0.999 9,线性范围为0.009 675～0.129 μg。原阿片碱的回归方程为：Y＝1×10-7X＋0.000 3,r＝0.999 2,线性范围为0.010 656～0.142 08 μg。醇提液去氢紫堇碱的回归方程为：Y＝4×10-8X－0.002 5,r＝0.999 3,线性范围为0.345～3.315 μg。延胡索乙素的回归方程为：Y＝1×10-7X＋8×10-5,r＝0.999 9,线性范围为0.032 25～0.372 5 μg。原阿片碱的回归方程为：Y＝1×10-7X－0.000 4,r＝0.999 2,线性范围为0.035 52～0.365 μg。
2.2.5 方法学考察
2.2.5.1 精密度
精密吸取供试品溶液,重复进样6次,测得去氢紫堇碱峰面积RSD＝0.04%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.23%,原阿片碱峰面积RSD＝0.65%,表明精密度良好。
2.2.5.2 稳定性
取同一供试品溶液,分别于0、2、4、6、8、10 h进样测定,测得水提液中去氢紫堇碱峰面积RSD＝1.10%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.40%,原阿片碱峰面积RSD＝1.10%；醇提液中去氢紫堇碱峰面积RSD＝1.20%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.50%,原阿片碱峰面积RSD＝1.50%。表明供试品溶液在10 h内稳定。
会计论文发表
2.2.5.3 重复性
取同一批号样品,按照供试品溶液的制备方法,分别制备6份供试品溶液,测定水提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱的平均含量分别为 1.298、0.484 3、0.498 mg/g,RSD分别为2.70%、2.10%、2.70%；醇提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱的平均含量分别为2.246、0.088 49、0.557 9 mg/g,RSD分别为2.77%、1.74%、2.58%。结果表明本方法重复性良好。
2.2.5.4 加样回收率试验
精称6份已测知含量的样品各0.25 g,添加各对照品溶液适量,按样品含量测定项下方法操作,测得水提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱平均加样回收率分别为99.50%、 99.75%、97.78%,RSD分别为2.90%、2.70%、 1.70%。结果见表1。醇提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱平均加样回收率分别为100.91%、97.24%、99.52%,RSD分别为 1.10%、1.68%、2.37%。结果见表2。表1 水提液加样回收率试验结果（略）表2 醇提液加样回收率试验结果（略）
2.2.6 样品含量测定
取各炮制样品,按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,精密吸取各供试品溶液10 μL,分别注入高效液相色谱仪,测定含量。结果见表3。表3 样品中3种有效成分含量比较（略）
由表3数据可看出,延胡索经炮制后水提液中生物碱含量均有所提高,醇提液中生物碱含量也有上升的趋势；延胡索鲜品直接经醋炙、醋煮、酒炙处理后,使去氢紫堇碱含量较高,延胡索产地水煮后可使延胡索乙素含量较高。
3 讨论
曾有研究表明,去氢紫堇碱在炮制后含量下降[4],但本实验发现,这3种延胡索生品经醋煮、醋炙和酒炙后,去氢紫堇碱含量都有所增加。有可能是炮制延胡索的条件不同使实验结果有较大差异,其中延胡索鲜品醋煮后去氢紫堇碱含量最高。因此,建议治疗冠心病时以鲜品炮制后入药为好。但延胡索鲜品进行水煮后去氢紫堇碱含量有所下降,可能与辅料的作用有关,其原理还有待进一步的研究。
本实验还发现,不管延胡索经过产地水煮处理与否,只要延胡索经醋炙、酒炙、醋煮过程后,其水提液中生物碱含量均比延胡索生品中含量高,说明临床上调配处方时选用延胡索炮制品是有科学道理的。醇提液中生物碱含量基本上也是提高的趋势。
鲜品延胡索在产地一般都要经过沸水煮至内无白心,这个过程可使延胡索质地变硬且角质样。本实验研究表明,延胡索鲜品直接进行醋炙、醋煮、酒炙操作,可保证延胡索炮制品中去氢紫堇碱含量较高,而鲜品水煮后再炮制可使延胡索乙素含量较高,两种方式对原阿片碱含量影响不大。延胡索鲜品直接炮制过程中,由于鲜品经晾干至一定程度后其质地疏松无角质样,从而利于辅料的吸入,因此,也可以考虑延胡索产地加工和炮制一体化处理的操作方式。
会计论文发表
【参考文献】
[1]普通高等教育中医药类规划教材.中药化学[M].上海：上海科学技术出版社,1997.59.
[2] 浙江省食品药品监督管理局.浙江省中药炮制规范[S].杭州：浙江科技出版社,2005.48－49.
[3] 天津市食品药品监督管理局.天津市中药饮片炮制规范[S].2005. 50.
[4] 王光宁,李 勇.炮制延胡索对延胡索乙素和去氢紫堇
【关键词】 延胡索；原阿片碱；去氢紫堇碱；延胡索乙素；高效液相色谱法；炮制
Abstract：Objective To explore the effect of different processes on the contents of active ingredients in Rhizoma Corydalis. Methods Processes of vinegar-boiling, vinegar-frying and alcohol-frying were used to fresh corydalis, boiled corydalis and purchased corydalis. Then the method of extraction by ultrasound with water and by reflux with methanol were used to extract the sample. The contents of Protopine, Tetrahydropalmatine and Dehydrocorydaline in corydalis was determined by RP-HPLC. Agilent TC-C18 (25 mm×4.6 mm, 5 μm) column was used at 35 ℃, with acetonitrile-0.1% phosphonic acid (pH 5.3 with triethylamine) (28∶72) as mobile phase. The flow rate was 1 mL/min and detection wavelength was set at 280 nm. Results In the sample extracted by water, the contents of active ingredients in processed products were higher than in corydalis. And in the sample extracted by methanol, it also has the tendency that the contents of active ingredients in processed products were higher than in corydalis. The content of Dehydrocorydaline in fresh corydalis which was processed by vinegar-boiling, vinegar-frying and alcohol- frying was high. The content of Tetrahydropalmatine in purchased corydalis which was processed by water-boiling at production place was high. Conclusion The method of determining active ingredients in Rhizoma Corydalis was established. It was convenient and the result was accurate. The process technology that fresh corydalis was boiled by water and then processed or fresh corydalis was processed in production place can be used.
Key words：Corydalis；Protopine；Dehydrocorydaline；Tetrahydropalmatine；HPLC；process
会计论文发表
延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎,具有活血、利气、止痛功效,临床用于治疗胸胁、脘腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻、跌扑肿痛等症[1],主产于浙江。延胡索中主要有效成分为生物碱,生物碱在药材中多数以结合态的生物碱盐存在,少数碱性极弱的以游离态形式存在。延胡索的药理作用表现为镇痛、催眠、降低冠脉阻力及增加血流量等,另外亦对心血管系统有较好的药理活性。延胡索多炮制后入药, 主要炮制方法为醋煮、醋炙和酒炙。本试验采用水超声提取法和甲醇加热回流提取法分别提取总生物碱盐和总生物碱,通过高效液相色谱法比较了不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素、原阿片碱和去氢紫堇碱含量的影响,为优化延胡索炮制工艺和阐明炮制机理奠定基础。
1 仪器与试药
烘箱DHG78-1(湖北省黄石市医疗器械厂)；日本岛津HPLC系统(SCL-10AVP HPLC Pump；SPD-ML0AVP二级管阵列检测器)；自动进样系统；超声波清洗器AS20500AT(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。甲醇、乙腈为色谱纯 (天津市协和昊鹏色谱科技有限公司)；其余试剂均为分析纯；水为超纯水。延胡索乙素(批号0726-200409,中国药品生物制品检定所)；去氢紫堇碱(批号043-27611,日本和光纯药工业株式会社)；原阿片碱(批号0853-200201,中国药品生物制品检定所)。
鲜延胡索药材产自浙江东阳；市售延胡索购于天津中新药业集团股份有限公司药材分公司,产自浙江。经本校中药鉴定教研室马琳教授鉴定为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的块茎。
2 方法与结果
2.1 样品的制备
醋煮延胡索：取延胡索适量,加入20%的醋,加适量水没过药面,浸润4 h,煮干[2]。
醋炙延胡索：取延胡索适量,加入20%的醋,加适量水没过药面,浸润4 h,文火炒干[3]。
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酒炙延胡索：取延胡索适量,加入10%的酒,加适量水没过药面,浸润4 h,文火炒干。
鲜延胡索：将新鲜的延胡索经过晾晒后(含水量约为20%),除去泥土,洗净,按照上述各炮制方法进行炮制。
水煮延胡索：将新鲜的延胡索经过晾晒后(含水量约为20%),加水煮至内无白心,取出,干燥。按照上述各炮制方法进行炮制。
市售延胡索：直接按照各炮制方法进行炮制。
2.2 延胡索乙素、去氢紫堇碱和原阿片碱的含量测定
2.2.1 色谱条件与系统性试验
色谱柱为Agilent TC-C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),美国安杰伦公司；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH 5.3)＝28∶72,流速为1 mL/min,柱温为35 ℃,检测波长为280 nm。在此条件下,理论塔板数按延胡索乙素峰、去氢紫堇碱峰和原阿片碱峰计算均不低于3 000。空白溶剂色谱图中在与延胡索乙素、去氢紫堇碱、原阿片碱色谱峰相应位置上无色谱峰,说明此系统条件无干扰。色谱图见图1。
2.2.2 对照品溶液的制备
精称去氢紫堇碱对照品6.63 mg、延胡索乙素对照品2.15 mg、原阿片碱对照品1.776 mg,分别置10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度。再吸取去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱对照品溶液5、1.7、2 mL于同一10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,配制去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱浓度为0.331 5 mg/mL、0.036 55 mg/mL、0.035 52 mg/mL的混合对照品溶液。
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2.2.3 供试品溶液的制备
①水超声提取法：精称各样品粉末0.5 g,加水25 mL,称重,超声提取30 min后,再称重补足减失重量,过滤,共提取2次,合并滤液,定容到100 mL。过0.45 μm滤膜,取续滤液,即得。②甲醇回流提取法：参考文献[1], 精确称取各样品粉末0.5 g,精密加入浓氨试液-甲醇(1∶20)混合溶液50 mL,称定重量,冷浸1 h后加热回流1 h,放冷,再称定重量,用浓氨试液-甲醇(1∶20)混合溶液补足减失重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25 mL,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5 mL容量瓶中并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液。
2.2.4 线性关系的考察
精密吸取混合对照品储备液,以甲醇配置成不同浓度的混标溶液,分别吸取10 μL注入高效液相色谱仪,测定峰面积。以峰面积为横坐标,进样量为纵坐标,绘制标准曲线。测定水提液去氢紫堇碱的回归方程为：Y＝3×10-8X＋0.000 5,r＝0.999 9,线性范围为0.025 875～0.345 μg。延胡索乙素的回归方程为：Y＝1×10-7X＋0.000 2,r＝0.999 9,线性范围为0.009 675～0.129 μg。原阿片碱的回归方程为：Y＝1×10-7X＋0.000 3,r＝0.999 2,线性范围为0.010 656～0.142 08 μg。醇提液去氢紫堇碱的回归方程为：Y＝4×10-8X－0.002 5,r＝0.999 3,线性范围为0.345～3.315 μg。延胡索乙素的回归方程为：Y＝1×10-7X＋8×10-5,r＝0.999 9,线性范围为0.032 25～0.372 5 μg。原阿片碱的回归方程为：Y＝1×10-7X－0.000 4,r＝0.999 2,线性范围为0.035 52～0.365 μg。
2.2.5 方法学考察
2.2.5.1 精密度
精密吸取供试品溶液,重复进样6次,测得去氢紫堇碱峰面积RSD＝0.04%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.23%,原阿片碱峰面积RSD＝0.65%,表明精密度良好。
2.2.5.2 稳定性
取同一供试品溶液,分别于0、2、4、6、8、10 h进样测定,测得水提液中去氢紫堇碱峰面积RSD＝1.10%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.40%,原阿片碱峰面积RSD＝1.10%；醇提液中去氢紫堇碱峰面积RSD＝1.20%,延胡索乙素峰面积RSD＝0.50%,原阿片碱峰面积RSD＝1.50%。表明供试品溶液在10 h内稳定。
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2.2.5.3 重复性
取同一批号样品,按照供试品溶液的制备方法,分别制备6份供试品溶液,测定水提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱的平均含量分别为 1.298、0.484 3、0.498 mg/g,RSD分别为2.70%、2.10%、2.70%；醇提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱的平均含量分别为2.246、0.088 49、0.557 9 mg/g,RSD分别为2.77%、1.74%、2.58%。结果表明本方法重复性良好。
2.2.5.4 加样回收率试验
精称6份已测知含量的样品各0.25 g,添加各对照品溶液适量,按样品含量测定项下方法操作,测得水提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱平均加样回收率分别为99.50%、 99.75%、97.78%,RSD分别为2.90%、2.70%、 1.70%。结果见表1。醇提液中去氢紫堇碱、延胡索乙素、原阿片碱平均加样回收率分别为100.91%、97.24%、99.52%,RSD分别为 1.10%、1.68%、2.37%。结果见表2。表1 水提液加样回收率试验结果（略）表2 醇提液加样回收率试验结果（略）
2.2.6 样品含量测定
取各炮制样品,按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,精密吸取各供试品溶液10 μL,分别注入高效液相色谱仪,测定含量。结果见表3。表3 样品中3种有效成分含量比较（略）
由表3数据可看出,延胡索经炮制后水提液中生物碱含量均有所提高,醇提液中生物碱含量也有上升的趋势；延胡索鲜品直接经醋炙、醋煮、酒炙处理后,使去氢紫堇碱含量较高,延胡索产地水煮后可使延胡索乙素含量较高。
3 讨论
曾有研究表明,去氢紫堇碱在炮制后含量下降[4],但本实验发现,这3种延胡索生品经醋煮、醋炙和酒炙后,去氢紫堇碱含量都有所增加。有可能是炮制延胡索的条件不同使实验结果有较大差异,其中延胡索鲜品醋煮后去氢紫堇碱含量最高。因此,建议治疗冠心病时以鲜品炮制后入药为好。但延胡索鲜品进行水煮后去氢紫堇碱含量有所下降,可能与辅料的作用有关,其原理还有待进一步的研究。
本实验还发现,不管延胡索经过产地水煮处理与否,只要延胡索经醋炙、酒炙、醋煮过程后,其水提液中生物碱含量均比延胡索生品中含量高,说明临床上调配处方时选用延胡索炮制品是有科学道理的。醇提液中生物碱含量基本上也是提高的趋势。
鲜品延胡索在产地一般都要经过沸水煮至内无白心,这个过程可使延胡索质地变硬且角质样。本实验研究表明,延胡索鲜品直接进行醋炙、醋煮、酒炙操作,可保证延胡索炮制品中去氢紫堇碱含量较高,而鲜品水煮后再炮制可使延胡索乙素含量较高,两种方式对原阿片碱含量影响不大。延胡索鲜品直接炮制过程中,由于鲜品经晾干至一定程度后其质地疏松无角质样,从而利于辅料的吸入,因此,也可以考虑延胡索产地加工和炮制一体化处理的操作方式。
会计论文发表
【参考文献】
[1]普通高等教育中医药类规划教材.中药化学[M].上海：上海科学技术出版社,1997.59.
[2] 浙江省食品药品监督管理局.浙江省中药炮制规范[S].杭州：浙江科技出版社,2005.48－49.
[3] 天津市食品药品监督管理局.天津市中药饮片炮制规范[S].2005. 50.
[4] 王光宁,李 勇.炮制延胡索对延胡索乙素和去氢紫堇
