慢性粒细胞白血病染色体核型与血清碱性磷酸酶水平的相关性

【关键词】  慢性粒细胞白血病 核型 碱性磷酸酶

     慢性粒细胞白血病（chronic myelocytic leukemia,CML）为一种起源于造血干细胞的恶性疾病，临床分为慢性期、加速期和急变期三个过程，在加速期和急变期过程中疾病本质发生变化，患者临床表现和治疗效果均有差异。我们对不同时期CML患者血清碱性磷酸酶（alkaliphosphatase，ALP)及骨髓细胞染色体核型进行了研究，旨在探讨血清ALP水平与CML临床分期及染色体核型变化的关系。现报告如下。职称论文发表网

    1  对象与方法

    1.1  病例选择

    病例来源于2000年1月至2006年10月我院门诊及住院的慢性粒细胞白血病患者，所有病例均按照FAB诊断标准确诊，不包括合并感染、实体肿瘤、慢性肝病和免疫性疾病的CML患者。研究对象分为CML慢性期组和CML加速或急变期组，正常对照组为健康体检者。CML慢性期组20例，其中男12例，女8例，年龄15～69岁，中位年龄42岁。CML加速急变期组18例，其中男13例，女5例，年龄16～70岁，中位年龄40岁。

    1.2  标本采集

    无菌抽取患者清晨空腹静脉血2 ml，形成血凝块后以2 000 r/min离心20 min后分离血清，-80℃冰箱保存待测。

    1.3  观察指标及方法

    观察患者血清LDH，HBDH（α?羟丁酸），外周血白细胞数，骨髓内幼稚细胞数比例。血清LDH，HBDH用生化法直接检测。外周血白细胞数、骨髓内幼稚细胞数比例分别由全血细胞自动分析仪及显微镜镜检。细胞染色体核型判定：无菌抽取CML患者髂后上脊骨髓4 ml，按常规制备染色体，R显带后行核型分析，分析20个中期分裂相，按人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN）1995［1］进行染色体核型描述。

    1.4  统计学处理

    计量指标以±s表示，各组ALP，WBC和幼稚细胞间采用方差分析及Q检验，计数资料用χ2检验。职称论文发表网

    2  结  果

    2.1细胞染色体核型分布与比较

    20例慢性期CML患者仅有t(9;22)(q34;q11)（Ph1）异常者16例(80%)，4例(20%)患者出现除t(9;22)(q34;q11)以外的复杂核型，分别为：45，x,-y t(9;22)(q34;q11)1例； 47，xx, +8 t(9;22)(q34;q11)1例；45，x，-y/45xy，-8 1例；涉及第3条染色体1例为变异易位即46xy, t(x;9;22)(p21;q34;q22)。18例加速或急变期患者中，仅t(9;22)(q34;q11)者10例（55%），复杂核型者8例（45%），包括45，x, -y ，t(9;22)(q34;q11)2例；46,x,t(x;9;22)(q26;q34;q11)2例；46，x，y, t(7;9;22)(q31;q34;q11)1例；47，x，x, +8，t(9;22)(q34;q11)2例; 46，x，y,t(x;9;22)(p21;q34;q22)1例。统计学比较结果显示：加速或急变期CML组复杂核型染色体出现频率明显高于慢性期CML组（χ2检验,P<0.001）。

    2.2  各组LDH，HBDH、外周血白细胞数、骨髓幼稚细胞数比较

    4组中对3项指标方差分析显示ALP 、幼稚细胞（原始细胞+早幼粒细胞+晚幼粒细胞）组间差异有统计学意义（F值分别为：4.78，7.01，P值分别为0.007，0.001），外周白细胞数组间差异无统计学意义。进一步作Q检验，具体比较结果见表1。表1  慢性粒细胞白血病慢性期组、加速急变组各指标比较  ALP，WBC、幼稚细胞三者两两指标间相关分析显示，慢性期 Ph阳性组ALP与白细胞数呈正相关（r=0.52，P=0.03），其他组内各指标间无相关。职称论文发表网

   3  讨  论

    CML是一种以中、晚幼粒细胞过度异质增生为特征的疾病，文献报道95%患者白血病细胞中具有t(9; 22)（q34;q11)异常［2］。随着病情发展，患者骨髓细胞染色体常会出现复杂核型［3］。本组患者加速或急变期复杂核型发生率为45%，明显高于CML慢性期组正说明了这一点。

    ALP是中性粒细胞有丝分裂后的一种标志酶。现已明确：CML患者由于其白血病细胞内ALP 基因表达下降，故细胞内NAP(neutrophilic alkaline phosphatase)积分为阴性［4］。本资料显示加速和急变期Ph阳性组ALP水平不仅高于慢性期Ph阳性组，而且高于慢性期复杂核型组，而加速/急变期复杂核型组ALP水平高于慢性期复杂核型组。这些结果说明ALP水平的升高与CML白血病细胞染色体核型演变有一定相关性。本资料中慢性期组 Ph阳性组ALP与白细胞数也呈正相关（r=0.52，P=0.03）。也有文献报道：急性白血病及慢性白血病急性期患者黑色素瘤特异性抗原（PRAME）高表达与患者白细胞数、血小板数、血清ALP,LDH等指标相关［5］，由此推测CML患者血清ALP水平变化有可能是白血病细胞遗传背景变化所致的细胞生物学特性变化的表现之一。

    有文献报道CML患者骨髓细胞PRV?1mRNA高表达并致维生素B12，ALP水平升高，从而加强干、祖细胞接受增殖、分化的信号，细胞增殖增加，凋亡减少［6］。加速急变期CML患者血清ALP升高是否与此有关有待进一步研究。有文献报道：难治性前列腺癌细胞患者血清ALP升高［7］；难治性多发性骨髓瘤患者WT1表达增加后ALP表达水平增高［8］。这些表明恶性疾病中，患者血清ALP水平升高具有一定的临床意义。

    综上所述，血清ALP水平与CML患者临床分期、染色体核型演变关系密切，可为CML病情发展及预后判断提供更多信息。职称论文发表网

【参考文献】
  ［1］ Mitelman F.ISCN(1995):An International System for Human Cytogenetic Nomenclature［M］. Basel: Switzerland Karger,1995.

［2］ Zitzelsberger H,Bauchinger M, Wilmanns W, et al. Cytogenetic and molecular analysis of a “masked” philadelphia chromosome in chronic and blastic phases of chronic myeloid leukemia［J］. Cancer Genet Cytogenet,1990,47(2):219-225.

［3］ 薛志科，金 洁，陈志妹，等. 25例伴复杂变异易位的慢性粒细胞白血病细胞遗传学分析［J］.中华血液学杂志，2006，27(5)：351-352.

［4］ Dotti G, Garattini E, Borleri G, et al. Leucocyte alkaline phosphatase identifies terminally differentiated normal neutrophils and its lack in chronic myelogenous leukaemia is not dependent on p210 tyrosine kinase activity［J］. Br J Haematol, 1999,105(1):163-172.

［5］ Paydas S, Tanriverdi K, Yavuz S, et al. PRAME mRNA levels in cases with acute leukemia: clinical importance and future prospects［J］. Am J Hematol，2005,79(4):257-261.

［6］ Bennett M, Stroncek DF. Recent advances in the bcr?abl negative chronic myeloproliferative diseases［J］. J Transl Med，2006,4:41.

［7］ Ross RW, Halabi S, Ou SS, et al. Predictors of prostate cancer tissue acquisition by an undirected core bone marrow biopsy in metastatic castration?resistant prostate cancer—a Cancer and Leukemia Group B study［J］. Clin Cancer Res，2005,11(22):8109-8113.职称论文发表网