宫颈液基细胞学介绍及制片体会
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发布者：益莉娜 刘尽国 王秀玲 丁佩芬 张金宇
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时间：2011年1月07日 09:46
近年来宫颈癌的发病年龄趋于年轻化，使宫颈癌的预防和筛查形势更加严峻。因此，早发现早治疗，将其阻断在癌前病变阶段显得尤为重要。随着细胞病理学的发展，液基细胞学(LCT)又称自动薄层制片技术改革了标本的采集和处理方法，以其良好的性能和理想的染色效果已开始逐步取代人工染色。因为传统宫颈涂片在标本取材与制作上存在许多缺陷，使筛查的假阴性率一直较高。其主要原因：(1)标本需要诊断的上皮细胞没被取到玻片上。(2)传统宫颈涂片质量较差，背景中存在在量黏液，血液及炎细胞遮盖了上皮细胞，使阅读者易产生疲劳感而影响正常判断。 如何快速发表论文
我院自2009年8月引进超柏氏液基自动薄层细胞学制片技术以来，已制片4000余张。现将该技术的要点和使用体会介绍如下：
1 材料与方法
1.1仪器与试剂 采用新顺国际有限公司Auto Cyte Prep液基薄层细胞自动制片机。随机配备的一次性材料包括：细胞采集器、细胞收集瓶、标本转移注射器、试管、吸嘴、胶环、载波片及0.75苏木精和EA/OG等。 如何快速发表论文
1.2染色过程
1.2.1标本采集 临床医师将采集器上的宫颈刷置入宫颈口旋转数圈，将采集到子宫颈脱落细胞的宫颈刷直接置入存有细胞保存液的收集瓶内，保存液使红细胞和粘液降解，以利制片。
1.2.2 细胞标本的转移和离心 在人工控制下，经涡旋振荡使采集器上的细胞进入瓶内液体中，样本吸取机自动完成标本的混悬，并将其移入盛有比重液的试管中。经过两次离心，液体吸取组件吸走上层悬浮液，除去样本中的非诊断性成分，如细胞碎屑、粘液等，使有诊断价值的细胞富集于试管底部，试管放在振荡器上，试管底部的凝集细胞重新恢复悬浮状态混匀。
1.2.3薄层细胞处理系统进行染色，将盛有细胞的试管置于薄层细胞处理机上，启动染色系统，在平台上进行巴氏染色，1次可自动染色48份标本，整个过程约2.5h。
1.2.4封固取出玻片 经过二甲苯处理，保持玻片湿润，常规中性树胶封固。
2 结果
玻片背景干净，染色鲜艳均匀，胞核胞质清晰，被检细胞集中，有助于对异常细胞的筛查。 如何快速发表论文
3 可能出现问题分析
3.1细胞结构显示不清，原因可能：①吸管吸力过低；②吸废液的导管管道阻塞。
3.2细胞量过少，可能因为：①样本中的细胞量过少；②吸管吸力过高；③覆盖组织的溶液过少或过期。
3.3细胞核染色过深，分析可能：①苏木精染色时间过长；②配置的缓冲液酸碱度不正确。
3.4玻片上有棕色斑片，或许因为：①玻片干燥固定，造成细胞发生皱缩，影响细胞形态；②样本中比重高的成分未被离心吸走，混杂在细胞当中。
4 制片中应注意的一些事项
4.1小瓶标本经助手转移至离心管后,注意检查是否因为保存液较少或标本粘液成分过多,导致只有部分或没有标本转移至离心管。
4.2离心时注意标本的配平。
4.3第一次离心后，吸走上层废液，观察是否有因为吸液头阻塞或标本粘液过多，导致废液没有完全吸走。
4.4第二次离心完成以后，标本震荡要充分，否则会出现成片成团的细胞，震荡标本时，手指不要握住离心管。震荡完成后上机制片。
4.5开始制片和染色前，要检查管道是否插入对应的试剂瓶，试剂的量是否足够，管道是否完全插入试剂瓶底。
4.6机器经过清洗以后制第一批片子时，在prime all tubing before run？的选项中，要选择Yes。
4.7开始制片前要注意观察管道是否通畅，废液槽是否有液体残留。 如何快速发表论文
4.8小清洗完成后检查酒精瓶盖是否盖好。
4.9废液瓶的废液倒掉后，必须拧紧瓶盖。
4.10在制片过程中，如果出现管道阻塞或其他异常情况，立即按F10键，让制片程序暂停，分析原因，解决问题后按回车键可以接着制片。
4.11定期清洗，防止机器管道内滋生细菌。
5 总结
LCT 检测将标本中的黏液、血液和炎细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径13mm涂片， LCT不仅提供了足够量的标本，而且还改善了涂片的质量，使不正常的上皮细胞易被辨认，降低了不满意涂片数量。有研究表明，LCT能明显提高宫颈异常细胞检出率[1]，阳性检出率明显升高,是预防宫颈癌的有效方法[2]。 LCT的报告系统即TBS报告反映了当代对子宫颈癌及癌前期病变的最新认识，提出了统一的诊断术语，对各种病变均有明确的定义和诊断标准而且面向临床，对各种病变提出了相应的处理原则；在提高我国妇科细胞学诊断水平的同时与国际诊断模式接轨。此项检查技术具有科学性、新颖先进性、适用实用性。操作无创，受检者无痛苦，易于接受。总之，液基细胞学(LCT)检查是诊断和发现宫颈癌及其癌前病变的有效手段。 如何快速发表论文
参 考 文 献
[1]顾美皎．TBS系统中异常上皮细胞的诊断和处理[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,9(8):466—467．
[2]林志新.液基超薄宫颈细胞涂片2011例临床分析[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,19(30):599—602．
我院自2009年8月引进超柏氏液基自动薄层细胞学制片技术以来，已制片4000余张。现将该技术的要点和使用体会介绍如下：
1 材料与方法
1.1仪器与试剂 采用新顺国际有限公司Auto Cyte Prep液基薄层细胞自动制片机。随机配备的一次性材料包括：细胞采集器、细胞收集瓶、标本转移注射器、试管、吸嘴、胶环、载波片及0.75苏木精和EA/OG等。 如何快速发表论文
1.2染色过程
1.2.1标本采集 临床医师将采集器上的宫颈刷置入宫颈口旋转数圈，将采集到子宫颈脱落细胞的宫颈刷直接置入存有细胞保存液的收集瓶内，保存液使红细胞和粘液降解，以利制片。
1.2.2 细胞标本的转移和离心 在人工控制下，经涡旋振荡使采集器上的细胞进入瓶内液体中，样本吸取机自动完成标本的混悬，并将其移入盛有比重液的试管中。经过两次离心，液体吸取组件吸走上层悬浮液，除去样本中的非诊断性成分，如细胞碎屑、粘液等，使有诊断价值的细胞富集于试管底部，试管放在振荡器上，试管底部的凝集细胞重新恢复悬浮状态混匀。
1.2.3薄层细胞处理系统进行染色，将盛有细胞的试管置于薄层细胞处理机上，启动染色系统，在平台上进行巴氏染色，1次可自动染色48份标本，整个过程约2.5h。
1.2.4封固取出玻片 经过二甲苯处理，保持玻片湿润，常规中性树胶封固。
2 结果
玻片背景干净，染色鲜艳均匀，胞核胞质清晰，被检细胞集中，有助于对异常细胞的筛查。 如何快速发表论文
3 可能出现问题分析
3.1细胞结构显示不清，原因可能：①吸管吸力过低；②吸废液的导管管道阻塞。
3.2细胞量过少，可能因为：①样本中的细胞量过少；②吸管吸力过高；③覆盖组织的溶液过少或过期。
3.3细胞核染色过深，分析可能：①苏木精染色时间过长；②配置的缓冲液酸碱度不正确。
3.4玻片上有棕色斑片，或许因为：①玻片干燥固定，造成细胞发生皱缩，影响细胞形态；②样本中比重高的成分未被离心吸走，混杂在细胞当中。
4 制片中应注意的一些事项
4.1小瓶标本经助手转移至离心管后,注意检查是否因为保存液较少或标本粘液成分过多,导致只有部分或没有标本转移至离心管。
4.2离心时注意标本的配平。
4.3第一次离心后，吸走上层废液，观察是否有因为吸液头阻塞或标本粘液过多，导致废液没有完全吸走。
4.4第二次离心完成以后，标本震荡要充分，否则会出现成片成团的细胞，震荡标本时，手指不要握住离心管。震荡完成后上机制片。
4.5开始制片和染色前，要检查管道是否插入对应的试剂瓶，试剂的量是否足够，管道是否完全插入试剂瓶底。
4.6机器经过清洗以后制第一批片子时，在prime all tubing before run？的选项中，要选择Yes。
4.7开始制片前要注意观察管道是否通畅，废液槽是否有液体残留。 如何快速发表论文
4.8小清洗完成后检查酒精瓶盖是否盖好。
4.9废液瓶的废液倒掉后，必须拧紧瓶盖。
4.10在制片过程中，如果出现管道阻塞或其他异常情况，立即按F10键，让制片程序暂停，分析原因，解决问题后按回车键可以接着制片。
4.11定期清洗，防止机器管道内滋生细菌。
5 总结
LCT 检测将标本中的黏液、血液和炎细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径13mm涂片， LCT不仅提供了足够量的标本，而且还改善了涂片的质量，使不正常的上皮细胞易被辨认，降低了不满意涂片数量。有研究表明，LCT能明显提高宫颈异常细胞检出率[1]，阳性检出率明显升高,是预防宫颈癌的有效方法[2]。 LCT的报告系统即TBS报告反映了当代对子宫颈癌及癌前期病变的最新认识，提出了统一的诊断术语，对各种病变均有明确的定义和诊断标准而且面向临床，对各种病变提出了相应的处理原则；在提高我国妇科细胞学诊断水平的同时与国际诊断模式接轨。此项检查技术具有科学性、新颖先进性、适用实用性。操作无创，受检者无痛苦，易于接受。总之，液基细胞学(LCT)检查是诊断和发现宫颈癌及其癌前病变的有效手段。 如何快速发表论文
参 考 文 献
[1]顾美皎．TBS系统中异常上皮细胞的诊断和处理[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,9(8):466—467．
[2]林志新.液基超薄宫颈细胞涂片2011例临床分析[J]．中国实用妇科与产科杂志,2003,19(30):599—602．
